内容概要柠檬酸合酶Citrate Synthase, CS是真核生物线粒体基质中的标志性酶也是三羧酸循环的第一个限速酶直接决定线粒体能量代谢的通量与效率其活性变化是评价线粒体功能、判断线粒体生物发生的核心指标广泛应用于代谢疾病、肿瘤、神经退行性疾病、植物抗逆、微生物代谢等研究领域。传统 CS 活性检测需要自行配制多种试剂操作流程复杂酶易失活对实验人员技术要求高且结果重复性差。Abbkine 亚科因生物 CheKine™柠檬酸合酶CS活性检测试剂盒微量法货号KTB1023采用经典比色法原理优化了酶提取体系与反应配方可准确定量动植物组织、细胞等多种样本中的 CS 酶活性配套详细的样本制备与结果计算方案操作门槛低、数据稳定性强是线粒体与能量代谢研究的可靠工具。产品介绍Abbkine 亚科因生物 CheKine™柠檬酸合酶活性检测试剂盒微量法全套组分包含专用提取缓冲液、试剂 Ⅰ 至试剂 Ⅵ 共 7 种试剂覆盖样本提取、酶促反应、显色检测全流程需求单盒规格为 48 次检测可满足中等规模样本的检测需求。产品采用蓝冰冷链运输全程低温保障酶类试剂的活性收到试剂后需按照说明书要求对应储存整体试剂盒有效期为 6 个月。针对柠檬酸合酶易失活的特性试剂盒明确了严格的操作规范样本提取与检测全程需在冰上操作推荐使用新鲜制备的样本最大程度保留酶的天然活性酶促反应过程中需控制吸光度变化值 ΔA 在 0.01-0.3 的线性范围内若超出范围需对样本进行稀释保障定量准确性不同批次、不同厂家的试剂不可混用避免出现结果异常其中试剂 Ⅱ 具有一定毒性操作时需做好个人防护。此外试剂盒提供了详细的蛋白定量建议与酶活计算公式支持基于蛋白浓度的酶活标准化保障不同样本间的数据可比性。检测原理该试剂盒基于经典的 DTNB 显色法原理实现柠檬酸合酶活性的准确定量。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶 A 与草酰乙酸发生缩合反应生成柠檬酸与辅酶 ACoA-SH反应体系中偶联的显色底物 5,5- 二硫代双 (2 - 硝基苯甲酸)DTNB可与生成的辅酶 A 反应生成带有特征黄色的 2 - 硝基 - 5 - 硫代苯甲酸TNB。TNB 在 412nm 波长处具有最大特征吸收峰在酶促反应的线性范围内单位时间内 412nm 处吸光度的上升速率与样本中柠檬酸合酶的活性呈严格正相关。通过连续监测反应体系的吸光度变化计算单位时间内的吸光度差值结合摩尔消光系数、反应体系体积与样本蛋白浓度即可换算得到样本中柠檬酸合酶的比活性。该方法原理成熟可靠是目前柠檬酸合酶活性检测的通用金标准方法广泛被国际学术期刊认可。产品优势检测灵敏度高特异性强优化的酶提取体系可最大程度保留 CS 的天然活性减少提取过程中的酶活损失反应底物经过纯度优化非特异性反应低检测特异性强可准确反映样本中真实的 CS 酶活性水平适合低丰度样本的检测。样本适配广泛覆盖多领域研究支持动物组织、植物组织、培养细胞、微生物等多种类型样本的检测一套试剂可满足基础医学、植物科学、微生物学等不同研究方向的 CS 活性检测需求有效降低科研采购成本尤其适合交叉学科研究场景。操作指引详尽降低实验门槛试剂盒提供从样本采集、提取制备、试剂配制到上机检测、结果计算、异常问题排查的全流程详细操作说明针对不同类型样本给出专属的提取建议与稀释参考即使是首次开展 CS 活性检测的研究者也能快速掌握实验方法减少预实验摸索的时间与成本。质量控制严格数据稳定可靠所有试剂组分均经过严格的质量验证批次间差异小检测结果重复性优异明确的操作规范与线性范围要求可有效避免操作误差带来的结果偏差保障实验数据的稳定性与可比性适合长期课题的连续跟踪检测。应用领域线粒体功能与能量代谢基础研究CS 作为线粒体的标志性酶其活性可直接反映线粒体的数量与功能状态用于研究线粒体生物发生、线粒体自噬、呼吸链功能调控等基础生物学问题是线粒体研究的核心检测指标。肿瘤代谢重编程研究肿瘤细胞的 Warburg 效应伴随线粒体功能的重塑CS 活性的变化可反映三羧酸循环的活性与代谢重编程的程度用于研究肿瘤代谢的调控机制评价靶向代谢通路的抗肿瘤药物的作用效果。神经退行性疾病研究线粒体功能障碍是阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病的核心病理特征通过检测神经组织与细胞中的 CS 活性变化可评价线粒体损伤程度研究神经退行性疾病的发病机制筛选神经保护药物。植物抗逆与呼吸代谢研究逆境胁迫会影响植物线粒体的呼吸功能CS 活性变化可反映植物线粒体的抗逆响应用于研究植物对干旱、低温、盐碱等胁迫的适应机制筛选抗逆作物品种。总结Abbkine 亚科因生物 CheKine™柠檬酸合酶CS活性检测试剂盒微量法货号KTB1023以经典的 DTNB 比色法为核心针对酶活检测的痛点优化了提取与反应体系兼具灵敏度高、特异性强、样本适配广、操作友好的多重优势。无论是线粒体功能基础研究、肿瘤代谢重编程探索还是植物抗逆生理、微生物代谢工程研究该试剂盒都能提供稳定、准确的 CS 酶活性定量数据为能量代谢相关研究提供可靠的技术支撑。